Dataset description

These data were generated by the Goff and Brown labs as preliminary data for a project to understand the cell type-specific differences in gene expression in the developing and adult motor cortex of a mouse model of familial Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS). Dissected M1 cortices were enzymatically dissociated and used as input for the 10x Genomics 3’ Gene Expression Profiling system (V2).

10x Genomics sequencing workflow overview

10x Genomics sequencing workflow overview

Data availability

Interactive dataset browser: http://neurocoglab.gofflab.org

Code/scripts to reproduce todays lab: https://github.com/gofflab/neurocog_scRNA_seq

Data link: https://drive.google.com/open?id=1sSoBnsXhOrLTC-EsTdSk18h4lEiZHQ8D

Objectives for Today

Importing Preprocessed Data

This tutorial assumes that we have already performed the initial preprocessing of the data using the cellRanger pipeline from 10x Genomics. One of the main results of this preprocessing is a \(genes X cells\) matrix of Unique Molecular Identifier (UMI) counts. E.g.:

cell1 cell2 cell3
gene1 0 2 0
gene2 15 7 3
gene3 1 0 2

So let’s import the raw count data from the cellRanger output. The key files here are matrix.mtx, barcodes.tsv, and genes.tsv.

cellranger_dir <- 'data/10x/preprocessed'
raw <- load_cellranger_matrix(cellranger_dir)
## Searching for genomes in: data/10x/preprocessed/outs/filtered_gene_bc_matrices_mex 
## Using mm10 in folder: data/10x/preprocessed/outs/filtered_gene_bc_matrices_mex/mm10 
## Loaded matrix information
## Loaded gene information
## Loaded barcode information
## Could not find summary csv: 
##   data/10x/preprocessed/outs/metrics_summary.csv.
## This file is only necessary if you are performing depth-normalization (calling the equalize_gbms function) in R.
## If this pipestance was produced by `cellranger aggr` with the default parameters, depth-normalization in R (via equalize_gbms) is not necessary.
#saveRDS(raw,'data/raw.rds')
raw
## GeneBCMatrix (storageMode: environment)
## assayData: 27998 features, 55371 samples 
##   element names: exprs 
## protocolData: none
## phenoData
##   sampleNames: AAACCTGAGACACTAA-1 AAACCTGAGACCCACC-1 ...
##     TTTGTCATCTCCGGTT-10 (55371 total)
##   varLabels: barcode
##   varMetadata: labelDescription
## featureData
##   featureNames: ENSMUSG00000051951 ENSMUSG00000089699 ...
##     ENSMUSG00000095742 (27998 total)
##   fvarLabels: id symbol
##   fvarMetadata: labelDescription
## experimentData: use 'experimentData(object)'
## Annotation:

Data cleaning and Annotation

We would also like to add a bit of external information about the genes and samples (cells) to help us make some better interpretations downstream. This annotation corresponds to metadata about how and when the samples were processed, as well as some of the important parameterizations for our experimental questions.

# Prep for CDS
fd <- fData(raw)
#change default feature column names to Monocle-friendly terms
colnames(fd) <- c("gene_id","gene_short_name")

# Prep for CDS
pd <- pData(raw)
# Extract sample 'number' information from barcode (cell_id) substring
pd$sample_num<-as.numeric(str_sub(pd$barcode, start= 18))

Merge in external annotations

sample_info<-read.csv('data/annotation/sample_aggregation.csv',header=T)
#sample_info<-sample_info[,-2]

master_sample_sheet<-read.csv('data/annotation/sample_info.csv',header=T)

#Merge cellranger aggr data with external annotation
sample_info<-merge(sample_info,master_sample_sheet,by.x="library_id",by.y="sample_id",sort = FALSE)

DT::datatable(sample_info)
#Merge all annotation with pd
pd<-merge(pd,sample_info,by.x='sample_num',by.y=0,sort=F)
rownames(pd)<-pd$barcode

The CellDataSet object

Many R packages for high-throughput sequencing data use a general structure for data organization (Class) derived from the Bioconductor ExpressionSet object. The Monocle package defines the CellDataSet class, which inherits from ExpressionSet, to hold and manipulate single cell RNA-Seq data. The layout of a CDS object is roughly as follows:

Schematic of the Monocle CellDataSet class

Schematic of the Monocle CellDataSet class

Here we create the Monocle CellDataSet object from our imported, cleaned, and annotated data. This is the data object that we will be modifying/exploring for the rest of the tutorial.

Create monocle CDS object

dat <- newCellDataSet(exprs(raw),
                  phenoData = new("AnnotatedDataFrame", data = pd),
                  featureData = new("AnnotatedDataFrame", data = fd),
                  lowerDetectionLimit = 0.5,
                  expressionFamily = negbinomial.size())

dat
## CellDataSet (storageMode: environment)
## assayData: 27998 features, 55371 samples 
##   element names: exprs 
## protocolData: none
## phenoData
##   sampleNames: AAACCTGAGACACTAA-1 AAACCTGAGACCCACC-1 ...
##     TTTGTCATCTCCGGTT-10 (55371 total)
##   varLabels: sample_num barcode ... Size_Factor (26 total)
##   varMetadata: labelDescription
## featureData
##   featureNames: ENSMUSG00000051951 ENSMUSG00000089699 ...
##     ENSMUSG00000095742 (27998 total)
##   fvarLabels: gene_id gene_short_name
##   fvarMetadata: labelDescription
## experimentData: use 'experimentData(object)'
## Annotation:

Subsetting cells

For the exclusive purposes of this lab, and to allow for things to run in a reasonable timeframe, we are going to reduce the number of cells we will consider randomly by ~ 90%. (This is not normally done, but we won’t get through much in this lab unless we cull).

#sampleFactor<-0.1
#sampleCellBarcodes<-sample(rownames(pData(dat)),dim(dat)[2]*sampleFactor)
#write.csv(sampleCellBarcodes,'data/annotation/sampleCellBarcodes.csv')
sampleCellBarcodes<-read.csv('data/annotation/sampleCellBarcodes.csv',stringsAsFactors = FALSE)$x
dat<-dat[,sampleCellBarcodes]

dat
## CellDataSet (storageMode: environment)
## assayData: 27998 features, 5537 samples 
##   element names: exprs 
## protocolData: none
## phenoData
##   sampleNames: ACACCGGTCACTTCAT-10 TCGTAGAAGCTAAACA-6 ...
##     GTTACAGAGTGTACTC-4 (5537 total)
##   varLabels: sample_num barcode ... Size_Factor (26 total)
##   varMetadata: labelDescription
## featureData
##   featureNames: ENSMUSG00000051951 ENSMUSG00000089699 ...
##     ENSMUSG00000095742 (27998 total)
##   fvarLabels: gene_id gene_short_name
##   fvarMetadata: labelDescription
## experimentData: use 'experimentData(object)'
## Annotation:

Data QC and Filtering

Before we move on to exploration and annotation of the data, we first need to get some summary statistics such as a scaling factor and an estimate of the dispersion for each gene (variance in excess of what is expected for a given model fit).

dat<-estimateSizeFactors(dat)
dat<-estimateDispersions(dat,cores=4)
## Processing block 1/1 ... OK
## Warning in log(ifelse(y == 0, 1, y/mu)): NaNs produced
## Warning: step size truncated due to divergence
## Removing 79 outliers
#saveRDS(dat,'data/dat.rds')

Gene QC metrics

Minimum number of cells expressing a given gene

It’s a good idea, and saves time/effort to identify and only consider genes whose expression levels are detected in a certain number or proportion of cells within your assay.

dat<-detectGenes(dat)
cellCutoff<-20
expressed_genes <- row.names(subset(fData(dat),
    num_cells_expressed >= cellCutoff))

hist(fData(dat)$num_cells_expressed,col="red",breaks=50,main="Number of cells expressing a given gene")

hist(log10(fData(dat)$num_cells_expressed),col="red",breaks=50,main="Number of cells expressing a given gene")
abline(v=log10(cellCutoff),lty="dashed")

We have now identified a total of 14241 that are detectably expressed in at least 20 cells in our dataset.

Distribution of gene mean copies per cell

What is the average expression level (in mRNA Copies per cell) for each gene?

fData(dat)$mean_cpc<-Matrix::rowMeans(exprs(dat))
hist(log10(fData(dat[expressed_genes,])$mean_cpc),col="purple",breaks=50,main="Mean RNA copies per cell")

Cell QC metrics

Distribution of detected genes across cells

How many genes are expressed in a given cell?

hist(pData(dat)$num_genes_expressed,col="darkgreen",breaks=50,main="Number of genes expressed per cell")

Mt-genome proportion

A high proportion of mitochondrial genes may indicate a lower than ideal capture efficiency for a given cell.

mito_genes<-fData(dat)$gene_id[grepl("^mt-",fData(dat)$gene_short_name)]

pData(dat)$mt_reads <- Matrix::colSums(exprs(dat)[mito_genes,])
pData(dat)$total_reads  <- Matrix::colSums(exprs(dat))
pData(dat)$mito_ratio <- pData(dat)$mt_reads/pData(dat)$total_reads

ggplot(pData(dat),
       aes(x = num_genes_expressed, y = mito_ratio)) + 
       geom_point() +
       labs(x = "Number of genes", y = "Mitochondrial ratio") +
       scale_color_brewer(palette = "Set1") +
       theme(legend.position = "none") + 
       monocle:::monocle_theme_opts()

Total mRNAs per cell

To get a general picture of the capture efficiency and depth of information for each cell we can look at the total mRNA mass recovered per cell.

pData(dat)$Total_mRNA<-Matrix::colSums(exprs(dat))

hist(pData(dat)$Total_mRNA,col="darkblue",breaks=50,main="Total mRNAs sequenced per cell")

Bonus question: How many mRNAs do we expect are in a given eukaryotic cell?

For each of the above QC ‘criterion’ we can define thresholds that can be used to filter cells/genes to improve the quality of the dataset. Here is usually where obvious doublet cells (more than one cell is associated with a single barcode sequence) or low-quality cells are removed prior to doing any further statistical interpretations.

Selection of High-Variance Genes

disp_table = dispersionTable(dat)
disp_table = disp_table %>% mutate(excess_disp =
  (dispersion_empirical - dispersion_fit) / dispersion_fit) %>%
    arrange(plyr::desc(excess_disp))

expression_cutoff<-1e-04
top_subset_genes = intersect(fData(dat)$gene_id[fData(dat)$mean_cpc>=expression_cutoff],disp_table$gene_id[disp_table$excess_disp>0])
#top_subset_genes = as.character(head(disp_table, 1000)$gene_id)

dat <- setOrderingFilter(dat, top_subset_genes)

plot_ordering_genes(dat)
## Warning: Transformation introduced infinite values in continuous y-axis

Monocle Preprocessing

Standard secondary preprocessing for single cell RNA-Seq involves projecting expression data into the top principal components to identify ranked sources of variation. This is usually done after log-transforming the data to stabilize the variance across the dynamic range of gene expression. Monocle conveniently provides a function preprocessCDS() that will do this transform and PCA analysis.

#log-transform and initial PCA
dat <- preprocessCDS(dat,  method = 'PCA',
                         norm_method = 'log',
                         num_dim = 25, #Arbitrary....I should look at scree plot.
                         verbose = T)
## Remove noise by PCA ...
## Processing block 1/1 ... OK
plot_pc_variance_explained(dat,max_components=50)
## Processing block 1/1 ... OK

By looking at a scree-plot of the variance explained by each component, you can pick a reasonable threshold number of components to incorporate into the downstream analysis. Here we have chosen 25 components as slightly past the tangent point for the curve.

Dimensionality Reduction

A crucial next step is to summarize the set of significant learned principal components into an interpretable set of dimensions (e.g. 2). You may recognize these as t-SNE plots, although a more robust, faster, and appropriate algorithm Uniform Manifold Approximation and Projection (UMAP) is currently being promoted.

#UMAP dimensionality reduction
dat <- reduceDimension(dat, max_components = 2,
                       reduction_method = 'UMAP',
                       metric="correlation",
                       #metric="cosine",
                       #min_dist = 0.75,
                       #n_neighbors = 50,
                       verbose = T
                        )
## Retrieving normalized data ...
## Running Uniform Manifold Approximation and Projection

Cell Clustering

Our next task is to find and annotate groups of cells with similar transcriptional profiles. To do this, we will use a fast and robust ‘community detection algorithm’ called Louvain clustering.

dat <- clusterCells(dat,
                        method = 'louvain',
                        res = 1e-3,
                        #res = NULL,
                        louvain_iter = 1,
                        verbose = T)
## Run kNN based graph clustering starts:
##   -Input data of 5537 rows and 2 columns
##   -k is set to 20
##   Finding nearest neighbors...DONE ~ 0.022 s
##   Compute jaccard coefficient between nearest-neighbor sets ...DONE ~ 0.007 s
##   Build undirected graph from the weighted links ...DONE ~ 0.026 s
##   Run louvain clustering on the graph ...
## Running louvain iteration  1 ...
## Current iteration is 1; current resolution is 0.001; Modularity is 0.893428684149716; Number of clusters are 18
## Maximal modularity is 0.893428684149716; corresponding resolution is 0.001
## 
## Run kNN based graph clustering DONE, totally takes 0.38129711151123 s.
##   -Number of clusters: 18

And now lets see what our learned clusters/communities look like. Remember, at this point, we haven’t looked for or filtered for a single marker gene to identify cell types. This is part of the power of using the aggregate transcriptional profile (well, high-variance genes at least) to identify these clusters in an unbiased manner. ### Visualizations

cell_size<-0.2
pdf("figures/initial_clustering.pdf")
plot_cell_clusters(dat,color="Cluster", cell_size=cell_size, show_group_id = T) + guides(color=FALSE) + coord_equal(1)
plot_cell_clusters(dat,color="Genotype", cell_size=cell_size) + scale_color_manual(values=c("red","grey40"))

plot_cell_clusters(dat,color="Sex", cell_size=cell_size) + scale_color_manual(values=c("orange","darkblue"))
plot_cell_clusters(dat,color="library_id", cell_size=cell_size)
dev.off()
## quartz_off_screen 
##                 2

Embedding shapes

  • Sometimes, clearly defined cell types are obvious puncta in a 2D embedding
  • Other times, what you think of as a single cell type may be broken up into several ‘subtypes’
  • Still more, a single cell ‘type’ may consist of several ‘cell states’ that might present as more of an amorphous shape in an embedding
  • Cells in an ergodic transitioning state may be represented as a ‘pseeudotemporal trajectory’ as different cells pass through different phases of the transition.
    • These trajectories can be very useful as a high-resolution timecourse for how cells respond to changes or cues.
  • What types of shape:stories might be represented in these clusters? What cell types do we expect to find in a P6-7 mouse motor cortex?

Annotating cells by marker gene expression

Some (not all) of the markers came from here http://casestudies.brain-map.org/celltax

First, we will make a few plots with known marker(anchor) genes to place some of the learned clusters into their biological contexts.

pdf("figures/Markers.pdf",width=15,height=15)
#Interneuron markers
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Gad1","Vip","Chat","Sst","Lhx6","Pvalb","Htr3a"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Interneurons")  + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Gad2","Pvalb","Sst","Vip","Ndnf","Cck"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Interneurons-Level 1 Markers")  + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
# Excitatory markers
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Slc17a6","Slc17a7","Rorb","Ctgf"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Pyramidals")  + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Pantr1","Cux2","Satb2"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Upper layers")  + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Cdh13","Ctgf","Tle4","Bcl11b"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Deep layers")  + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Cux2","Nr5a1","Scnn1a","Tg3","Rorb","Tg2","Rbp4","Ntsr1","Ctgf","Cdh13","Chrna6"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Excitatory - Rough Laminar Markers")  + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Sla","S100a3","Macc1","Olfr78","Wfdc18","Wfdc17","Aldh1a7","Oprk1","Rgs8","Htr2c","Hpgd","Sdc1","Trh","Cpa6","Ppp1r18","Fam150a","F2r","P2ry12","Mup3"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Excitatory - ALM Excitatory markers Economo et al")  + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
# Brain Fibroblasts
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Lum","Col1a1","Lama1","Efemp1","Dcn","Col6a1"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Brain Fibroblasts") + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
# Vascular endothelium
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Vwf","Kit","Flt1"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Vascular Endothelium") + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
# Vascular Smooth muscle
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Bgn"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Vascular Smooth Muscle")  + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
# Astrocytes
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Gfap","Slc1a3","Aqp4"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Astrocytes") + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
# Neural progenitors
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Fabp7","Pax6","Sox2","Hes5","Nes","Eomes","Id2","Msi1","Sox1","Igfbpl1","Riiad1","Top2a","Ascl1"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Neural Progenitors") + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
# Oligodendrocytes
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Mbp","Mobp","Pdgfra","Bmp4","Tmem2"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Oligodendrocytes")  + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
# Microglia
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Ctss"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Microglia")  + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
# Erythrocytes
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Hbb-bt","Hbb-bs","Hba-x","Hba-a1"), cell_size=cell_size) + ggtitle("Erythrocytes")
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.
dev.off()
## quartz_off_screen 
##                 2
plot_cell_clusters(dat, markers=c("Slc17a6","Slc17a7","Rorb","Ctgf"), cell_size=1) + ggtitle("Pyramidals")  + coord_equal(1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.

The expression of these known marker genes across clusters can be used to infer celltype:cluster associations.

Cluster-specific marker genes

Similar to differential expression, we can identify novel marker genes for individual clusters. We can do this using Moran’s I test for spatial autocorrelation in the 2D UMAP embedding. First we must learn the relationship between cells in the UMAP embedding. We do this by first learning a principal graph structure and identify genes with significant spatial autocorrelation along the graph using principalGraphTest(). We will use the results of the Moran’s I test as a ‘relatedness’ filter for putative marker genes for each cluster.

#Takes ~45 min to run...
start <- Sys.time()
spatial_res <- principalGraphTest(dat[expressed_genes,], relative_expr = TRUE, k = 10, cores = 6,verbose=TRUE)
## retrieve the matrices for Moran's test...
## Performing Moran's test: ...
## 
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA NA
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA 05:29:54
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA 01:24:01
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA 01:04:28
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA 57:19
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA 53:52
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA 51:53
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA 50:19
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA 47:58
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA 48:27
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA 49:10
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA 48:56
  |                                                             
  |                                                       |   0%, ETA 50:44
  |                                                             
  |                                                       |   1%, ETA 47:27
  |                                                             
  |                                                       |   1%, ETA 52:28
  |                                                             
  |                                                       |   1%, ETA 53:58
  |                                                             
  |                                                       |   1%, ETA 55:12
  |                                                             
  |                                                       |   1%, ETA 55:24
  |                                                             
  |                                                       |   1%, ETA 56:16
  |                                                             
  |                                                       |   1%, ETA 55:50
  |                                                             
  |                                                       |   1%, ETA 56:29
  |                                                             
  |                                                       |   1%, ETA 56:52
  |                                                             
  |                                                       |   1%, ETA 57:12
  |                                                             
  |                                                       |   1%, ETA 57:17
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 56:07
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 57:43
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 57:34
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 57:26
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 57:48
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 58:00
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 58:28
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 58:56
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 59:29
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 01:02:44
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 01:01:37
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 01:00:18
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 59:07
  |                                                             
  |=                                                      |   1%, ETA 58:55
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 58:18
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 57:33
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 56:52
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 56:16
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 55:49
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 55:15
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 54:51
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 54:28
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 53:54
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 53:18
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 52:37
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 52:08
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 52:06
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 52:10
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 52:17
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 52:11
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 51:59
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 52:03
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 52:19
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 52:29
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 52:37
  |                                                             
  |=                                                      |   2%, ETA 52:49
  |                                                             
  |=                                                      |   3%, ETA 52:11
  |                                                             
  |=                                                      |   3%, ETA 52:56
  |                                                             
  |=                                                      |   3%, ETA 53:30
  |                                                             
  |=                                                      |   3%, ETA 53:11
  |                                                             
  |=                                                      |   3%, ETA 52:30
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 52:02
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 51:30
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 50:47
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 50:29
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 50:32
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 49:46
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 49:49
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 49:18
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 48:55
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 48:59
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 48:19
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 48:39
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 48:46
  |                                                             
  |==                                                     |   3%, ETA 48:59
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 48:41
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 49:06
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 49:09
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 49:19
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 49:25
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 49:33
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 49:40
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 49:53
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 49:55
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 49:27
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 49:14
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 48:46
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 48:38
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 48:12
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 48:05
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 47:42
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 47:36
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 47:13
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 47:10
  |                                                             
  |==                                                     |   4%, ETA 46:47
  |                                                             
  |==                                                     |   5%, ETA 46:53
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 46:41
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 46:23
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 46:29
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 46:32
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 46:52
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 46:54
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 47:01
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 47:08
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 47:08
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 47:02
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 47:09
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 47:04
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 46:51
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 46:38
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 46:22
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 46:13
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 45:53
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 45:50
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 45:43
  |                                                             
  |===                                                    |   5%, ETA 45:25
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 45:18
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 45:13
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 45:08
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:52
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:46
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:42
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:28
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:42
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:46
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:47
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:50
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 45:05
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:54
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:58
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:54
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:46
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:26
  |                                                             
  |===                                                    |   6%, ETA 44:27
  |                                                             
  |====                                                   |   6%, ETA 44:21
  |                                                             
  |====                                                   |   6%, ETA 44:05
  |                                                             
  |====                                                   |   6%, ETA 44:03
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 44:01
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:48
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:46
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:36
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:24
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:24
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:18
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:08
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:08
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:18
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:24
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:28
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:30
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:30
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:39
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:35
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:22
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:11
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:02
  |                                                             
  |====                                                   |   7%, ETA 43:00
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 42:58
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 42:53
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 42:45
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 42:40
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 42:34
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 42:26
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 42:21
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 42:16
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 42:09
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 42:04
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 41:58
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 41:52
  |                                                             
  |====                                                   |   8%, ETA 41:57
  |                                                             
  |=====                                                  |   8%, ETA 42:04
  |                                                             
  |=====                                                  |   8%, ETA 42:12
  |                                                             
  |=====                                                  |   8%, ETA 42:17
  |                                                             
  |=====                                                  |   8%, ETA 42:22
  |                                                             
  |=====                                                  |   8%, ETA 42:27
  |                                                             
  |=====                                                  |   8%, ETA 42:29
  |                                                             
  |=====                                                  |   8%, ETA 42:30
  |                                                             
  |=====                                                  |   8%, ETA 42:31
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 42:33
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 42:26
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 42:19
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 42:11
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 42:02
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:58
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:48
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:45
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:40
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:32
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:28
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:24
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:16
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:12
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:09
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:01
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:02
  |                                                             
  |=====                                                  |   9%, ETA 41:01
  |                                                             
  |=====                                                  |  10%, ETA 41:10
  |                                                             
  |=====                                                  |  10%, ETA 41:15
  |                                                             
  |=====                                                  |  10%, ETA 41:18
  |                                                             
  |=====                                                  |  10%, ETA 41:22
  |                                                             
  |=====                                                  |  10%, ETA 41:24
  |                                                             
  |=====                                                  |  10%, ETA 41:24
  |                                                             
  |=====                                                  |  10%, ETA 41:23
  |                                                             
  |=====                                                  |  10%, ETA 41:24
  |                                                             
  |=====                                                  |  10%, ETA 41:19
  |                                                             
  |=====                                                  |  10%, ETA 41:13
  |                                                             
  |=====                                                  |  10%, ETA 41:05
  |                                                             
  |======                                                 |  10%, ETA 41:01
  |                                                             
  |======                                                 |  10%, ETA 40:57
  |                                                             
  |======                                                 |  10%, ETA 40:50
  |                                                             
  |======                                                 |  10%, ETA 40:47
  |                                                             
  |======                                                 |  10%, ETA 40:40
  |                                                             
  |======                                                 |  10%, ETA 40:37
  |                                                             
  |======                                                 |  10%, ETA 40:29
  |                                                             
  |======                                                 |  10%, ETA 40:27
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:17
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:16
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:15
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:08
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:16
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:20
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:25
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:28
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:32
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:34
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:31
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:34
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:27
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:25
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:17
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:09
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:06
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 40:01
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 39:57
  |                                                             
  |======                                                 |  11%, ETA 39:52
  |                                                             
  |======                                                 |  12%, ETA 39:51
  |                                                             
  |======                                                 |  12%, ETA 39:47
  |                                                             
  |======                                                 |  12%, ETA 39:43
  |                                                             
  |======                                                 |  12%, ETA 39:39
  |                                                             
  |======                                                 |  12%, ETA 39:35
  |                                                             
  |======                                                 |  12%, ETA 39:30
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:27
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:27
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:27
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:32
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:35
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:34
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:34
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:33
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:37
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:37
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:38
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:35
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:30
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:24
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:17
  |                                                             
  |=======                                                |  12%, ETA 39:13
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 39:10
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 39:08
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 39:04
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 39:00
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:56
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:51
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:48
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:43
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:40
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:42
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:45
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:49
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:52
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:54
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:55
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:56
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:55
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:46
  |                                                             
  |=======                                                |  13%, ETA 38:46
  |                                                             
  |=======                                                |  14%, ETA 38:43
  |                                                             
  |=======                                                |  14%, ETA 38:34
  |                                                             
  |=======                                                |  14%, ETA 38:34
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:34
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:29
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:26
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:20
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:18
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:12
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:11
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:04
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:02
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:04
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:10
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:12
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:14
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:16
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:16
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:19
  |                                                             
  |========                                               |  14%, ETA 38:17
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 38:11
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 38:09
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 38:00
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 38:01
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:53
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:54
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:49
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:45
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:40
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:36
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:28
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:36
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:39
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:42
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:43
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:45
  |                                                             
  |========                                               |  15%, ETA 37:47
  |                                                             
  |=========                                              |  15%, ETA 37:47
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:43
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:39
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:34
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:29
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:23
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:23
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:19
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:16
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:12
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:08
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:06
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:08
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:09
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:12
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:11
  |                                                             
  |=========                                              |  16%, ETA 37:14
  |                                                             
  |=========                                              |  17%, ETA 37:12
  |                                                             
  |=========                                              |  17%, ETA 37:06
  |                                                             
  |=========                                              |  17%, ETA 37:01
  |                                                             
  |=========                                              |  17%, ETA 36:56
  |                                                             
  |=========                                              |  17%, ETA 36:54
  |                                                             
  |=========                                              |  17%, ETA 36:49
  |                                                             
  |=========                                              |  17%, ETA 36:47
  |                                                             
  |=========                                              |  17%, ETA 36:42
  |                                                             
  |=========                                              |  17%, ETA 36:40
  |                                                             
  |=========                                              |  17%, ETA 36:35
  |                                                             
  |=========                                              |  17%, ETA 36:33
  |                                                             
  |=========                                              |  17%, ETA 36:29
  |                                                             
  |==========                                             |  17%, ETA 36:29
  |                                                             
  |==========                                             |  17%, ETA 36:32
  |                                                             
  |==========                                             |  17%, ETA 36:34
  |                                                             
  |==========                                             |  17%, ETA 36:35
  |                                                             
  |==========                                             |  17%, ETA 36:35
  |                                                             
  |==========                                             |  17%, ETA 36:34
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:30
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:30
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:23
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:22
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:15
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:16
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:10
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:09
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:04
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:01
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:01
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 35:55
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 35:53
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 35:58
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:00
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:01
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 36:03
  |                                                             
  |==========                                             |  18%, ETA 35:58
  |                                                             
  |==========                                             |  19%, ETA 35:53
  |                                                             
  |==========                                             |  19%, ETA 35:51
  |                                                             
  |==========                                             |  19%, ETA 35:46
  |                                                             
  |==========                                             |  19%, ETA 35:42
  |                                                             
  |==========                                             |  19%, ETA 35:38
  |                                                             
  |==========                                             |  19%, ETA 35:34
  |                                                             
  |==========                                             |  19%, ETA 35:30
  |                                                             
  |==========                                             |  19%, ETA 35:26
  |                                                             
  |===========                                            |  19%, ETA 35:23
  |                                                             
  |===========                                            |  19%, ETA 35:26
  |                                                             
  |===========                                            |  19%, ETA 35:28
  |                                                             
  |===========                                            |  19%, ETA 35:30
  |                                                             
  |===========                                            |  19%, ETA 35:31
  |                                                             
  |===========                                            |  19%, ETA 35:27
  |                                                             
  |===========                                            |  19%, ETA 35:22
  |                                                             
  |===========                                            |  19%, ETA 35:17
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 35:16
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 35:11
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 35:11
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 35:05
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 35:05
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 35:00
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:57
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:57
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:56
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:55
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:55
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:58
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:55
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:53
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:50
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:46
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:44
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:40
  |                                                             
  |===========                                            |  20%, ETA 34:38
  |                                                             
  |===========                                            |  21%, ETA 34:35
  |                                                             
  |===========                                            |  21%, ETA 34:34
  |                                                             
  |===========                                            |  21%, ETA 34:30
  |                                                             
  |===========                                            |  21%, ETA 34:28
  |                                                             
  |===========                                            |  21%, ETA 34:26
  |                                                             
  |===========                                            |  21%, ETA 34:24
  |                                                             
  |===========                                            |  21%, ETA 34:22
  |                                                             
  |===========                                            |  21%, ETA 34:23
  |                                                             
  |===========                                            |  21%, ETA 34:24
  |                                                             
  |============                                           |  21%, ETA 34:21
  |                                                             
  |============                                           |  21%, ETA 34:20
  |                                                             
  |============                                           |  21%, ETA 34:17
  |                                                             
  |============                                           |  21%, ETA 34:13
  |                                                             
  |============                                           |  21%, ETA 34:10
  |                                                             
  |============                                           |  21%, ETA 34:07
  |                                                             
  |============                                           |  21%, ETA 34:05
  |                                                             
  |============                                           |  21%, ETA 34:01
  |                                                             
  |============                                           |  21%, ETA 34:00
  |                                                             
  |============                                           |  21%, ETA 33:56
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:54
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:52
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:53
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:55
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:55
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:51
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:47
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:43
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:39
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:36
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:33
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:30
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:28
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:25
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:27
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:23
  |                                                             
  |============                                           |  22%, ETA 33:20
  |                                                             
  |============                                           |  23%, ETA 33:18
  |                                                             
  |============                                           |  23%, ETA 33:14
  |                                                             
  |============                                           |  23%, ETA 33:12
  |                                                             
  |============                                           |  23%, ETA 33:08
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 33:07
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 33:05
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 33:03
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 33:00
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 32:58
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 32:59
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 32:56
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 32:53
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 32:50
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 32:48
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 32:44
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 32:42
  |                                                             
  |=============                                          |  23%, ETA 32:38
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:37
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:35
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:32
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:35
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:31
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:29
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:25
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:22
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:19
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:17
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:14
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:12
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:09
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:11
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:08
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:05
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 32:02
  |                                                             
  |=============                                          |  24%, ETA 31:59
  |                                                             
  |=============                                          |  25%, ETA 31:57
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:55
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:54
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:53
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:49
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:50
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:47
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:44
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:41
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:38
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:35
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:33
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:31
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:29
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:30
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:28
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:26
  |                                                             
  |==============                                         |  25%, ETA 31:22
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 31:21
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 31:19
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 31:16
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 31:14
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 31:12
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 31:17
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 31:13
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 31:10
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 31:06
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 31:03
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 31:00
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 30:57
  |                                                             
  |==============                                         |  26%, ETA 30:54
  |                                                             
  |===============                                        |  26%, ETA 30:51
  |                                                             
  |===============                                        |  26%, ETA 30:51
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:46
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:47
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:43
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:42
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:42
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:43
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:44
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:45
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:45
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:45
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:44
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:45
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:50
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:46
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:42
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:40
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:36
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:34
  |                                                             
  |===============                                        |  27%, ETA 30:34
  |                                                             
  |===============                                        |  28%, ETA 30:31
  |                                                             
  |===============                                        |  28%, ETA 30:31
  |                                                             
  |===============                                        |  28%, ETA 30:28
  |                                                             
  |===============                                        |  28%, ETA 30:25
  |                                                             
  |===============                                        |  28%, ETA 30:22
  |                                                             
  |===============                                        |  28%, ETA 30:19
  |                                                             
  |===============                                        |  28%, ETA 30:16
  |                                                             
  |===============                                        |  28%, ETA 30:17
  |                                                             
  |===============                                        |  28%, ETA 30:18
  |                                                             
  |===============                                        |  28%, ETA 30:19
  |                                                             
  |===============                                        |  28%, ETA 30:19
  |                                                             
  |================                                       |  28%, ETA 30:16
  |                                                             
  |================                                       |  28%, ETA 30:20
  |                                                             
  |================                                       |  28%, ETA 30:20
  |                                                             
  |================                                       |  28%, ETA 30:20
  |                                                             
  |================                                       |  28%, ETA 30:24
  |                                                             
  |================                                       |  28%, ETA 30:20
  |                                                             
  |================                                       |  28%, ETA 30:17
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 30:16
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 30:13
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 30:10
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 30:07
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 30:04
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 30:01
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 29:58
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 29:55
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 29:53
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 29:50
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 29:50
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 29:51
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 29:52
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 29:52
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 29:53
  |                                                             
  |================                                       |  29%, ETA 29:53
  |                                                             
  |================                                       |  30%, ETA 29:52
  |                                                             
  |================                                       |  30%, ETA 29:56
  |                                                             
  |================                                       |  30%, ETA 29:53
  |                                                             
  |================                                       |  30%, ETA 29:49
  |                                                             
  |================                                       |  30%, ETA 29:46
  |                                                             
  |================                                       |  30%, ETA 29:43
  |                                                             
  |================                                       |  30%, ETA 29:40
  |                                                             
  |=================                                      |  30%, ETA 29:39
  |                                                             
  |=================                                      |  30%, ETA 29:36
  |                                                             
  |=================                                      |  30%, ETA 29:33
  |                                                             
  |=================                                      |  30%, ETA 29:30
  |                                                             
  |=================                                      |  30%, ETA 29:27
  |                                                             
  |=================                                      |  30%, ETA 29:25
  |                                                             
  |=================                                      |  30%, ETA 29:25
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:23
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:26
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:27
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:27
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:27
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:27
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:30
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:27
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:23
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:20
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:17
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:14
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:10
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:10
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:07
  |                                                             
  |=================                                      |  31%, ETA 29:04
  |                                                             
  |=================                                      |  32%, ETA 29:01
  |                                                             
  |=================                                      |  32%, ETA 29:00
  |                                                             
  |=================                                      |  32%, ETA 28:58
  |                                                             
  |=================                                      |  32%, ETA 28:59
  |                                                             
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  |                                                             
  |=================                                      |  32%, ETA 29:00
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |==================                                     |  32%, ETA 29:02
  |                                                             
  |==================                                     |  32%, ETA 28:59
  |                                                             
  |==================                                     |  32%, ETA 28:56
  |                                                             
  |==================                                     |  32%, ETA 28:53
  |                                                             
  |==================                                     |  32%, ETA 28:50
  |                                                             
  |==================                                     |  32%, ETA 28:47
  |                                                             
  |==================                                     |  32%, ETA 28:44
  |                                                             
  |==================                                     |  32%, ETA 28:41
  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:39
  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:37
  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:33
  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:33
  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:32
  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:32
  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:32
  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:33
  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:35
  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:32
  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:29
  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:26
  |                                                             
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  |                                                             
  |==================                                     |  33%, ETA 28:20
  |                                                             
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  |                                                             
  |==================                                     |  34%, ETA 28:16
  |                                                             
  |==================                                     |  34%, ETA 28:13
  |                                                             
  |===================                                    |  34%, ETA 28:11
  |                                                             
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  |                                                             
  |===================                                    |  34%, ETA 28:06
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:50
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:50
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:47
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:44
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:41
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:40
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:40
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:40
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:43
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:40
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:36
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:34
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:31
  |                                                             
  |===================                                    |  35%, ETA 27:28
  |                                                             
  |====================                                   |  35%, ETA 27:27
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:25
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:24
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:21
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:19
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:16
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:15
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:16
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:16
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:18
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:15
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:12
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:09
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:06
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:04
  |                                                             
  |====================                                   |  36%, ETA 27:01
  |                                                             
  |====================                                   |  37%, ETA 27:00
  |                                                             
  |====================                                   |  37%, ETA 26:58
  |                                                             
  |====================                                   |  37%, ETA 26:55
  |                                                             
  |====================                                   |  37%, ETA 26:53
  |                                                             
  |====================                                   |  37%, ETA 26:51
  |                                                             
  |====================                                   |  37%, ETA 26:52
  |                                                             
  |====================                                   |  37%, ETA 26:54
  |                                                             
  |====================                                   |  37%, ETA 26:51
  |                                                             
  |====================                                   |  37%, ETA 26:48
  |                                                             
  |====================                                   |  37%, ETA 26:44
  |                                                             
  |====================                                   |  37%, ETA 26:41
  |                                                             
  |=====================                                  |  37%, ETA 26:40
  |                                                             
  |=====================                                  |  37%, ETA 26:39
  |                                                             
  |=====================                                  |  37%, ETA 26:36
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:33
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:31
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:27
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:27
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:27
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:28
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:25
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:22
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:19
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:16
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:14
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:13
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:12
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:09
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:08
  |                                                             
  |=====================                                  |  38%, ETA 26:06
  |                                                             
  |=====================                                  |  39%, ETA 26:04
  |                                                             
  |=====================                                  |  39%, ETA 26:03
  |                                                             
  |=====================                                  |  39%, ETA 26:02
  |                                                             
  |=====================                                  |  39%, ETA 26:04
  |                                                             
  |=====================                                  |  39%, ETA 26:03
  |                                                             
  |=====================                                  |  39%, ETA 26:02
  |                                                             
  |=====================                                  |  39%, ETA 25:59
  |                                                             
  |=====================                                  |  39%, ETA 25:57
  |                                                             
  |=====================                                  |  39%, ETA 25:55
  |                                                             
  |=====================                                  |  39%, ETA 25:53
  |                                                             
  |=====================                                  |  39%, ETA 25:51
  |                                                             
  |=====================                                  |  39%, ETA 25:49
  |                                                             
  |======================                                 |  39%, ETA 25:48
  |                                                             
  |======================                                 |  39%, ETA 25:46
  |                                                             
  |======================                                 |  39%, ETA 25:44
  |                                                             
  |======================                                 |  39%, ETA 25:42
  |                                                             
  |======================                                 |  39%, ETA 25:40
  |                                                             
  |======================                                 |  39%, ETA 25:40
  |                                                             
  |======================                                 |  39%, ETA 25:40
  |                                                             
  |======================                                 |  39%, ETA 25:40
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:38
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:35
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:32
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:29
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:26
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:24
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:21
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:19
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:18
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:18
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:17
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:14
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:11
  |                                                             
  |======================                                 |  40%, ETA 25:10
  |                                                             
  |======================                                 |  41%, ETA 25:07
  |                                                             
  |======================                                 |  41%, ETA 25:05
  |                                                             
  |======================                                 |  41%, ETA 25:03
  |                                                             
  |======================                                 |  41%, ETA 25:00
  |                                                             
  |======================                                 |  41%, ETA 24:58
  |                                                             
  |======================                                 |  41%, ETA 24:56
  |                                                             
  |======================                                 |  41%, ETA 24:56
  |                                                             
  |=======================                                |  41%, ETA 24:56
  |                                                             
  |=======================                                |  41%, ETA 24:56
  |                                                             
  |=======================                                |  41%, ETA 24:52
  |                                                             
  |=======================                                |  41%, ETA 24:51
  |                                                             
  |=======================                                |  41%, ETA 24:48
  |                                                             
  |=======================                                |  41%, ETA 24:47
  |                                                             
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  |                                                             
  |=======================                                |  41%, ETA 24:42
  |                                                             
  |=======================                                |  41%, ETA 24:41
  |                                                             
  |=======================                                |  41%, ETA 24:40
  |                                                             
  |=======================                                |  41%, ETA 24:37
  |                                                             
  |=======================                                |  42%, ETA 24:36
  |                                                             
  |=======================                                |  42%, ETA 24:36
  |                                                             
  |=======================                                |  42%, ETA 24:35
  |                                                             
  |=======================                                |  42%, ETA 24:32
  |                                                             
  |=======================                                |  42%, ETA 24:30
  |                                                             
  |=======================                                |  42%, ETA 24:27
  |                                                             
  |=======================                                |  42%, ETA 24:26
  |                                                             
  |=======================                                |  42%, ETA 24:23
  |                                                             
  |=======================                                |  42%, ETA 24:22
  |                                                             
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  |                                                             
  |=======================                                |  42%, ETA 24:18
  |                                                             
  |=======================                                |  42%, ETA 24:17
  |                                                             
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  |                                                             
  |=======================                                |  42%, ETA 24:15
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |========================                               |  43%, ETA 23:52
  |                                                             
  |========================                               |  43%, ETA 23:50
  |                                                             
  |========================                               |  43%, ETA 23:48
  |                                                             
  |========================                               |  43%, ETA 23:46
  |                                                             
  |========================                               |  43%, ETA 23:44
  |                                                             
  |========================                               |  43%, ETA 23:42
  |                                                             
  |========================                               |  43%, ETA 23:41
  |                                                             
  |========================                               |  43%, ETA 23:39
  |                                                             
  |========================                               |  43%, ETA 23:36
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:35
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:33
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:32
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:29
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:28
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:26
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:25
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:24
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:21
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:19
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:17
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:15
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:13
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:11
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:12
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:18
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:16
  |                                                             
  |========================                               |  44%, ETA 23:14
  |                                                             
  |========================                               |  45%, ETA 23:12
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 23:11
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 23:09
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 23:08
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 23:06
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 23:04
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 23:03
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 23:01
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:59
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:57
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:56
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:54
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:52
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:51
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:51
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:51
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:51
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:50
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:49
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:49
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:49
  |                                                             
  |=========================                              |  45%, ETA 22:49
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:49
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:49
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:48
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:48
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:49
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:47
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:45
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:42
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:39
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:37
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:34
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:32
  |                                                             
  |=========================                              |  46%, ETA 22:29
  |                                                             
  |==========================                             |  46%, ETA 22:27
  |                                                             
  |==========================                             |  46%, ETA 22:26
  |                                                             
  |==========================                             |  46%, ETA 22:24
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:23
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:23
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:22
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:22
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:22
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:21
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:21
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:21
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:20
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:20
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:21
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:19
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:16
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:13
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:10
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:09
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:07
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:06
  |                                                             
  |==========================                             |  47%, ETA 22:03
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 22:02
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 22:00
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:58
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:57
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:55
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:53
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:52
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:53
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:52
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:52
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:51
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:50
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:50
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:49
  |                                                             
  |==========================                             |  48%, ETA 21:50
  |                                                             
  |===========================                            |  48%, ETA 21:48
  |                                                             
  |===========================                            |  48%, ETA 21:47
  |                                                             
  |===========================                            |  48%, ETA 21:44
  |                                                             
  |===========================                            |  48%, ETA 21:42
  |                                                             
  |===========================                            |  48%, ETA 21:41
  |                                                             
  |===========================                            |  48%, ETA 21:38
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:38
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:36
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:35
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:33
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:31
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:30
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:28
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:26
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:25
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:23
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:21
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:22
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:22
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:21
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:20
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:20
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:21
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:18
  |                                                             
  |===========================                            |  49%, ETA 21:16
  |                                                             
  |===========================                            |  50%, ETA 21:14
  |                                                             
  |===========================                            |  50%, ETA 21:13
  |                                                             
  |===========================                            |  50%, ETA 21:11
  |                                                             
  |===========================                            |  50%, ETA 21:08
  |                                                             
  |===========================                            |  50%, ETA 21:06
  |                                                             
  |===========================                            |  50%, ETA 21:03
  |                                                             
  |===========================                            |  50%, ETA 21:01
  |                                                             
  |============================                           |  50%, ETA 21:00
  |                                                             
  |============================                           |  50%, ETA 20:59
  |                                                             
  |============================                           |  50%, ETA 20:56
  |                                                             
  |============================                           |  50%, ETA 20:53
  |                                                             
  |============================                           |  50%, ETA 20:53
  |                                                             
  |============================                           |  50%, ETA 20:53
  |                                                             
  |============================                           |  50%, ETA 20:52
  |                                                             
  |============================                           |  50%, ETA 20:52
  |                                                             
  |============================                           |  50%, ETA 20:52
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:50
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:48
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:46
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:43
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:41
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:38
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:36
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:34
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:31
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:30
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:28
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:26
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:26
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:26
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:25
  |                                                             
  |============================                           |  51%, ETA 20:24
  |                                                             
  |============================                           |  52%, ETA 20:24
  |                                                             
  |============================                           |  52%, ETA 20:25
  |                                                             
  |============================                           |  52%, ETA 20:23
  |                                                             
  |============================                           |  52%, ETA 20:20
  |                                                             
  |============================                           |  52%, ETA 20:18
  |                                                             
  |=============================                          |  52%, ETA 20:16
  |                                                             
  |=============================                          |  52%, ETA 20:15
  |                                                             
  |=============================                          |  52%, ETA 20:13
  |                                                             
  |=============================                          |  52%, ETA 20:10
  |                                                             
  |=============================                          |  52%, ETA 20:08
  |                                                             
  |=============================                          |  52%, ETA 20:05
  |                                                             
  |=============================                          |  52%, ETA 20:03
  |                                                             
  |=============================                          |  52%, ETA 20:00
  |                                                             
  |=============================                          |  52%, ETA 20:00
  |                                                             
  |=============================                          |  52%, ETA 20:00
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:59
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:59
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:59
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:57
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:54
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:52
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:49
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:47
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:44
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:42
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:39
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:37
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:36
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:35
  |                                                             
  |=============================                          |  53%, ETA 19:35
  |                                                             
  |=============================                          |  54%, ETA 19:33
  |                                                             
  |=============================                          |  54%, ETA 19:34
  |                                                             
  |=============================                          |  54%, ETA 19:34
  |                                                             
  |=============================                          |  54%, ETA 19:34
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:32
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:30
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:29
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:26
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:24
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:21
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:19
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:17
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:14
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:14
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:13
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:12
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:11
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:11
  |                                                             
  |==============================                         |  54%, ETA 19:11
  |                                                             
  |==============================                         |  55%, ETA 19:10
  |                                                             
  |==============================                         |  55%, ETA 19:10
  |                                                             
  |==============================                         |  55%, ETA 19:10
  |                                                             
  |==============================                         |  55%, ETA 19:07
  |                                                             
  |==============================                         |  55%, ETA 19:05
  |                                                             
  |==============================                         |  55%, ETA 19:03
  |                                                             
  |==============================                         |  55%, ETA 19:01
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |==============================                         |  55%, ETA 18:48
  |                                                             
  |==============================                         |  55%, ETA 18:47
  |                                                             
  |==============================                         |  55%, ETA 18:47
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |===============================                        |  56%, ETA 18:34
  |                                                             
  |===============================                        |  56%, ETA 18:32
  |                                                             
  |===============================                        |  56%, ETA 18:30
  |                                                             
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  |                                                             
  |===============================                        |  56%, ETA 18:26
  |                                                             
  |===============================                        |  56%, ETA 18:24
  |                                                             
  |===============================                        |  56%, ETA 18:24
  |                                                             
  |===============================                        |  56%, ETA 18:24
  |                                                             
  |===============================                        |  56%, ETA 18:24
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |===============================                        |  57%, ETA 18:09
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |===============================                        |  57%, ETA 18:03
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |=================================                      |  60%, ETA 16:41
  |                                                             
  |=================================                      |  60%, ETA 16:39
  |                                                             
  |=================================                      |  60%, ETA 16:37
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |==================================                     |  62%, ETA 15:46
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:44
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:43
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:41
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:39
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:38
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:36
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:34
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:32
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:31
  |                                                             
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  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:28
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:27
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:26
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:26
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:25
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:24
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:23
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:23
  |                                                             
  |====================================                   |  65%, ETA 14:22
  |                                                             
  |====================================                   |  66%, ETA 14:22
  |                                                             
  |====================================                   |  66%, ETA 14:20
  |                                                             
  |====================================                   |  66%, ETA 14:18
  |                                                             
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  |                                                             
  |====================================                   |  66%, ETA 14:14
  |                                                             
  |====================================                   |  66%, ETA 14:12
  |                                                             
  |====================================                   |  66%, ETA 14:09
  |                                                             
  |====================================                   |  66%, ETA 14:07
  |                                                             
  |====================================                   |  66%, ETA 14:05
  |                                                             
  |====================================                   |  66%, ETA 14:03
  |                                                             
  |====================================                   |  66%, ETA 14:00
  |                                                             
  |=====================================                  |  66%, ETA 13:58
  |                                                             
  |=====================================                  |  66%, ETA 13:57
  |                                                             
  |=====================================                  |  66%, ETA 13:56
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:56
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:55
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:54
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:53
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:52
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:52
  |                                                             
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  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:48
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:46
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:45
  |                                                             
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  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:41
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:39
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:38
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:36
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:35
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:32
  |                                                             
  |=====================================                  |  67%, ETA 13:31
  |                                                             
  |=====================================                  |  68%, ETA 13:30
  |                                                             
  |=====================================                  |  68%, ETA 13:29
  |                                                             
  |=====================================                  |  68%, ETA 13:27
  |                                                             
  |=====================================                  |  68%, ETA 13:27
  |                                                             
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  |                                                             
  |=====================================                  |  68%, ETA 13:26
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |=====================================                  |  68%, ETA 13:19
  |                                                             
  |=====================================                  |  68%, ETA 13:17
  |                                                             
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  |                                                             
  |======================================                 |  68%, ETA 13:12
  |                                                             
  |======================================                 |  68%, ETA 13:11
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:58
  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:57
  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:57
  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:56
  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:55
  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:54
  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:54
  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:53
  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:51
  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:49
  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:47
  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:45
  |                                                             
  |======================================                 |  69%, ETA 12:43
  |                                                             
  |======================================                 |  70%, ETA 12:41
  |                                                             
  |======================================                 |  70%, ETA 12:39
  |                                                             
  |======================================                 |  70%, ETA 12:37
  |                                                             
  |======================================                 |  70%, ETA 12:35
  |                                                             
  |======================================                 |  70%, ETA 12:32
  |                                                             
  |======================================                 |  70%, ETA 12:32
  |                                                             
  |======================================                 |  70%, ETA 12:31
  |                                                             
  |======================================                 |  70%, ETA 12:30
  |                                                             
  |=======================================                |  70%, ETA 12:29
  |                                                             
  |=======================================                |  70%, ETA 12:29
  |                                                             
  |=======================================                |  70%, ETA 12:28
  |                                                             
  |=======================================                |  70%, ETA 12:27
  |                                                             
  |=======================================                |  70%, ETA 12:26
  |                                                             
  |=======================================                |  70%, ETA 12:25
  |                                                             
  |=======================================                |  70%, ETA 12:22
  |                                                             
  |=======================================                |  70%, ETA 12:20
  |                                                             
  |=======================================                |  70%, ETA 12:18
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:17
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:16
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:13
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:11
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:09
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:07
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:05
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:04
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:03
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:02
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:01
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:01
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 12:00
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 11:58
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 11:56
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 11:54
  |                                                             
  |=======================================                |  71%, ETA 11:53
  |                                                             
  |=======================================                |  72%, ETA 11:52
  |                                                             
  |=======================================                |  72%, ETA 11:51
  |                                                             
  |=======================================                |  72%, ETA 11:48
  |                                                             
  |=======================================                |  72%, ETA 11:46
  |                                                             
  |=======================================                |  72%, ETA 11:44
  |                                                             
  |========================================               |  72%, ETA 11:44
  |                                                             
  |========================================               |  72%, ETA 11:42
  |                                                             
  |========================================               |  72%, ETA 11:40
  |                                                             
  |========================================               |  72%, ETA 11:39
  |                                                             
  |========================================               |  72%, ETA 11:38
  |                                                             
  |========================================               |  72%, ETA 11:37
  |                                                             
  |========================================               |  72%, ETA 11:36
  |                                                             
  |========================================               |  72%, ETA 11:36
  |                                                             
  |========================================               |  72%, ETA 11:34
  |                                                             
  |========================================               |  72%, ETA 11:32
  |                                                             
  |========================================               |  72%, ETA 11:30
  |                                                             
  |========================================               |  72%, ETA 11:28
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:27
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:25
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:23
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:21
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:19
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:17
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:14
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:14
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:13
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:12
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:11
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:09
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:07
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:05
  |                                                             
  |========================================               |  73%, ETA 11:03
  |                                                             
  |========================================               |  74%, ETA 11:02
  |                                                             
  |========================================               |  74%, ETA 11:00
  |                                                             
  |========================================               |  74%, ETA 10:59
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:58
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:57
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:54
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:53
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:51
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:50
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:49
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:48
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:47
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:45
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:43
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:42
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:40
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:38
  |                                                             
  |=========================================              |  74%, ETA 10:37
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:36
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:35
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:34
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:32
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:30
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:28
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:27
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:26
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:25
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:24
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:23
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:21
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:20
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:18
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:16
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:14
  |                                                             
  |=========================================              |  75%, ETA 10:13
  |                                                             
  |==========================================             |  75%, ETA 10:11
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 10:10
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 10:09
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 10:07
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 10:05
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 10:04
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 10:04
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 10:03
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 10:01
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 10:00
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 09:58
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 09:57
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 09:55
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 09:54
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 09:52
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 09:50
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 09:49
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 09:48
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 09:46
  |                                                             
  |==========================================             |  76%, ETA 09:45
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:45
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:44
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:43
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:42
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:41
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:39
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:37
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:35
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:34
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:32
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:31
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:30
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:28
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:26
  |                                                             
  |==========================================             |  77%, ETA 09:25
  |                                                             
  |===========================================            |  77%, ETA 09:25
  |                                                             
  |===========================================            |  77%, ETA 09:24
  |                                                             
  |===========================================            |  77%, ETA 09:23
  |                                                             
  |===========================================            |  77%, ETA 09:21
  |                                                             
  |===========================================            |  78%, ETA 09:19
  |                                                             
  |===========================================            |  78%, ETA 09:18
  |                                                             
  |===========================================            |  78%, ETA 09:16
  |                                                             
  |===========================================            |  78%, ETA 09:13
  |                                                             
  |===========================================            |  78%, ETA 09:12
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |===========================================            |  78%, ETA 09:00
  |                                                             
  |===========================================            |  78%, ETA 08:59
  |                                                             
  |===========================================            |  78%, ETA 08:57
  |                                                             
  |===========================================            |  78%, ETA 08:56
  |                                                             
  |===========================================            |  78%, ETA 08:55
  |                                                             
  |===========================================            |  78%, ETA 08:54
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:53
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:53
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:51
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:51
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:50
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:49
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:48
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:47
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:45
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:44
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:42
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:41
  |                                                             
  |===========================================            |  79%, ETA 08:39
  |                                                             
  |============================================           |  79%, ETA 08:39
  |                                                             
  |============================================           |  79%, ETA 08:38
  |                                                             
  |============================================           |  79%, ETA 08:37
  |                                                             
  |============================================           |  79%, ETA 08:36
  |                                                             
  |============================================           |  79%, ETA 08:35
  |                                                             
  |============================================           |  79%, ETA 08:34
  |                                                             
  |============================================           |  79%, ETA 08:33
  |                                                             
  |============================================           |  79%, ETA 08:32
  |                                                             
  |============================================           |  79%, ETA 08:31
  |                                                             
  |============================================           |  79%, ETA 08:30
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:29
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:28
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:26
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:25
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:23
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:23
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:21
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:20
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:19
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:19
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:17
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:16
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:14
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:13
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:11
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:09
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:07
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:06
  |                                                             
  |============================================           |  80%, ETA 08:05
  |                                                             
  |============================================           |  81%, ETA 08:03
  |                                                             
  |============================================           |  81%, ETA 08:02
  |                                                             
  |============================================           |  81%, ETA 08:00
  |                                                             
  |============================================           |  81%, ETA 07:59
  |                                                             
  |============================================           |  81%, ETA 07:57
  |                                                             
  |============================================           |  81%, ETA 07:55
  |                                                             
  |============================================           |  81%, ETA 07:54
  |                                                             
  |=============================================          |  81%, ETA 07:53
  |                                                             
  |=============================================          |  81%, ETA 07:52
  |                                                             
  |=============================================          |  81%, ETA 07:50
  |                                                             
  |=============================================          |  81%, ETA 07:49
  |                                                             
  |=============================================          |  81%, ETA 07:47
  |                                                             
  |=============================================          |  81%, ETA 07:46
  |                                                             
  |=============================================          |  81%, ETA 07:44
  |                                                             
  |=============================================          |  81%, ETA 07:43
  |                                                             
  |=============================================          |  81%, ETA 07:41
  |                                                             
  |=============================================          |  81%, ETA 07:40
  |                                                             
  |=============================================          |  81%, ETA 07:39
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:38
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:37
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:36
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:35
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:33
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:32
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:30
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:29
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:28
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:26
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:24
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:23
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:21
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:20
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:19
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:17
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:16
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:15
  |                                                             
  |=============================================          |  82%, ETA 07:14
  |                                                             
  |=============================================          |  83%, ETA 07:13
  |                                                             
  |=============================================          |  83%, ETA 07:12
  |                                                             
  |=============================================          |  83%, ETA 07:11
  |                                                             
  |=============================================          |  83%, ETA 07:10
  |                                                             
  |=============================================          |  83%, ETA 07:09
  |                                                             
  |=============================================          |  83%, ETA 07:08
  |                                                             
  |==============================================         |  83%, ETA 07:08
  |                                                             
  |==============================================         |  83%, ETA 07:07
  |                                                             
  |==============================================         |  83%, ETA 07:06
  |                                                             
  |==============================================         |  83%, ETA 07:05
  |                                                             
  |==============================================         |  83%, ETA 07:03
  |                                                             
  |==============================================         |  83%, ETA 07:02
  |                                                             
  |==============================================         |  83%, ETA 07:00
  |                                                             
  |==============================================         |  83%, ETA 06:58
  |                                                             
  |==============================================         |  83%, ETA 06:57
  |                                                             
  |==============================================         |  83%, ETA 06:55
  |                                                             
  |==============================================         |  83%, ETA 06:52
  |                                                             
  |==============================================         |  83%, ETA 06:51
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:47
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:46
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:44
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:43
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:42
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:41
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:40
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:39
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:38
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:37
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:36
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:35
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:34
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:32
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:31
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:29
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:27
  |                                                             
  |==============================================         |  84%, ETA 06:25
  |                                                             
  |==============================================         |  85%, ETA 06:24
  |                                                             
  |===============================================        |  85%, ETA 06:23
  |                                                             
  |===============================================        |  85%, ETA 06:21
  |                                                             
  |===============================================        |  85%, ETA 06:19
  |                                                             
  |===============================================        |  85%, ETA 06:17
  |                                                             
  |===============================================        |  85%, ETA 06:15
  |                                                             
  |===============================================        |  85%, ETA 06:13
  |                                                             
  |===============================================        |  85%, ETA 06:12
  |                                                             
  |===============================================        |  85%, ETA 06:11
  |                                                             
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  |                                                             
  |===============================================        |  85%, ETA 06:09
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |===============================================        |  85%, ETA 06:05
  |                                                             
  |===============================================        |  85%, ETA 06:04
  |                                                             
  |===============================================        |  85%, ETA 06:02
  |                                                             
  |===============================================        |  85%, ETA 06:01
  |                                                             
  |===============================================        |  86%, ETA 06:00
  |                                                             
  |===============================================        |  86%, ETA 05:58
  |                                                             
  |===============================================        |  86%, ETA 05:56
  |                                                             
  |===============================================        |  86%, ETA 05:54
  |                                                             
  |===============================================        |  86%, ETA 05:53
  |                                                             
  |===============================================        |  86%, ETA 05:51
  |                                                             
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  |                                                             
  |===============================================        |  86%, ETA 05:47
  |                                                             
  |===============================================        |  86%, ETA 05:46
  |                                                             
  |===============================================        |  86%, ETA 05:44
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |================================================       |  86%, ETA 05:38
  |                                                             
  |================================================       |  86%, ETA 05:37
  |                                                             
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  |                                                             
  |================================================       |  87%, ETA 05:35
  |                                                             
  |================================================       |  87%, ETA 05:34
  |                                                             
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  |                                                             
  |================================================       |  87%, ETA 05:30
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |================================================       |  87%, ETA 05:25
  |                                                             
  |================================================       |  87%, ETA 05:23
  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
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  |                                                             
  |================================================       |  87%, ETA 05:16
  |                                                             
  |================================================       |  87%, ETA 05:15
  |                                                             
  |================================================       |  87%, ETA 05:13
  |                                                             
  |================================================       |  87%, ETA 05:13
  |                                                             
  |================================================       |  87%, ETA 05:12
  |                                                             
  |================================================       |  87%, ETA 05:12
  |                                                             
  |================================================       |  87%, ETA 05:11
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 05:10
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 05:10
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 05:08
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 05:07
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 05:06
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 05:04
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 05:03
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 05:01
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 05:00
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 04:58
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 04:57
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 04:56
  |                                                             
  |================================================       |  88%, ETA 04:54
  |                                                             
  |=================================================      |  88%, ETA 04:53
  |                                                             
  |=================================================      |  88%, ETA 04:52
  |                                                             
  |=================================================      |  88%, ETA 04:50
  |                                                             
  |=================================================      |  88%, ETA 04:49
  |                                                             
  |=================================================      |  88%, ETA 04:48
  |                                                             
  |=================================================      |  88%, ETA 04:47
  |                                                             
  |=================================================      |  88%, ETA 04:45
  |                                                             
  |=================================================      |  88%, ETA 04:45
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:45
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:44
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:43
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:42
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:41
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:40
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:39
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:37
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:35
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:34
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:32
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:31
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:29
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:28
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:26
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:24
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:23
  |                                                             
  |=================================================      |  89%, ETA 04:21
  |                                                             
  |=================================================      |  90%, ETA 04:20
  |                                                             
  |=================================================      |  90%, ETA 04:18
  |                                                             
  |=================================================      |  90%, ETA 04:17
  |                                                             
  |=================================================      |  90%, ETA 04:16
  |                                                             
  |=================================================      |  90%, ETA 04:15
  |                                                             
  |=================================================      |  90%, ETA 04:14
  |                                                             
  |=================================================      |  90%, ETA 04:13
  |                                                             
  |=================================================      |  90%, ETA 04:11
  |                                                             
  |=================================================      |  90%, ETA 04:09
  |                                                             
  |==================================================     |  90%, ETA 04:08
  |                                                             
  |==================================================     |  90%, ETA 04:07
  |                                                             
  |==================================================     |  90%, ETA 04:05
  |                                                             
  |==================================================     |  90%, ETA 04:03
  |                                                             
  |==================================================     |  90%, ETA 04:02
  |                                                             
  |==================================================     |  90%, ETA 04:00
  |                                                             
  |==================================================     |  90%, ETA 03:58
  |                                                             
  |==================================================     |  90%, ETA 03:57
  |                                                             
  |==================================================     |  90%, ETA 03:55
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:55
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:54
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:53
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:52
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:51
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:50
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:48
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:47
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:46
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:44
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:43
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:41
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:39
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:38
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:36
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:35
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:34
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:32
  |                                                             
  |==================================================     |  91%, ETA 03:31
  |                                                             
  |==================================================     |  92%, ETA 03:30
  |                                                             
  |==================================================     |  92%, ETA 03:29
  |                                                             
  |==================================================     |  92%, ETA 03:29
  |                                                             
  |==================================================     |  92%, ETA 03:28
  |                                                             
  |==================================================     |  92%, ETA 03:27
  |                                                             
  |==================================================     |  92%, ETA 03:25
  |                                                             
  |==================================================     |  92%, ETA 03:24
  |                                                             
  |===================================================    |  92%, ETA 03:23
  |                                                             
  |===================================================    |  92%, ETA 03:21
  |                                                             
  |===================================================    |  92%, ETA 03:19
  |                                                             
  |===================================================    |  92%, ETA 03:18
  |                                                             
  |===================================================    |  92%, ETA 03:16
  |                                                             
  |===================================================    |  92%, ETA 03:15
  |                                                             
  |===================================================    |  92%, ETA 03:13
  |                                                             
  |===================================================    |  92%, ETA 03:12
  |                                                             
  |===================================================    |  92%, ETA 03:10
  |                                                             
  |===================================================    |  92%, ETA 03:09
  |                                                             
  |===================================================    |  92%, ETA 03:07
  |                                                             
  |===================================================    |  92%, ETA 03:06
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 03:06
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 03:05
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 03:04
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 03:02
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 03:01
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:59
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:57
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:56
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:54
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:52
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:51
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:49
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:48
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:46
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:45
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:43
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:43
  |                                                             
  |===================================================    |  93%, ETA 02:42
  |                                                             
  |===================================================    |  94%, ETA 02:41
  |                                                             
  |===================================================    |  94%, ETA 02:39
  |                                                             
  |===================================================    |  94%, ETA 02:38
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:37
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:36
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:34
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:33
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:31
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:30
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:28
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:26
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:25
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:23
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:22
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:21
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:19
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:18
  |                                                             
  |====================================================   |  94%, ETA 02:17
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 02:16
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 02:15
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 02:13
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 02:11
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 02:10
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 02:08
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 02:07
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 02:05
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 02:04
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 02:02
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 02:01
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 01:59
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 01:58
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 01:57
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 01:55
  |                                                             
  |====================================================   |  95%, ETA 01:53
  |                                                             
  |=====================================================  |  95%, ETA 01:52
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:51
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:49
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:48
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:47
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:45
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:44
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:43
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:42
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:40
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:39
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:38
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:37
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:35
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:34
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:32
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:31
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:29
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:28
  |                                                             
  |=====================================================  |  96%, ETA 01:26
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:26
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:24
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:24
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:22
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:21
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:20
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:19
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:17
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:16
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:14
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:13
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:11
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:10
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:08
  |                                                             
  |=====================================================  |  97%, ETA 01:08
  |                                                             
  |====================================================== |  97%, ETA 01:07
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  |====================================================== |  97%, ETA 01:06
  |                                                             
  |====================================================== |  97%, ETA 01:05
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  |====================================================== |  97%, ETA 01:03
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  |====================================================== |  97%, ETA 01:02
  |                                                             
  |====================================================== |  98%, ETA 01:02
  |                                                             
  |====================================================== |  98%, ETA 01:00
  |                                                             
  |====================================================== |  98%, ETA 00:59
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  |====================================================== |  98%, ETA 00:57
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  |====================================================== |  98%, ETA 00:56
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  |====================================================== |  98%, ETA 00:55
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  |====================================================== |  98%, ETA 00:52
  |                                                             
  |====================================================== |  98%, ETA 00:50
  |                                                             
  |====================================================== |  98%, ETA 00:49
  |                                                             
  |====================================================== |  98%, ETA 00:48
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  |====================================================== |  98%, ETA 00:46
  |                                                             
  |====================================================== |  98%, ETA 00:45
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  |====================================================== |  98%, ETA 00:43
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  |====================================================== |  98%, ETA 00:42
  |                                                             
  |====================================================== |  98%, ETA 00:40
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  |====================================================== |  98%, ETA 00:39
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  |====================================================== |  98%, ETA 00:38
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  |====================================================== |  98%, ETA 00:37
  |                                                             
  |====================================================== |  99%, ETA 00:37
  |                                                             
  |====================================================== |  99%, ETA 00:36
  |                                                             
  |====================================================== |  99%, ETA 00:35
  |                                                             
  |====================================================== |  99%, ETA 00:33
  |                                                             
  |====================================================== |  99%, ETA 00:32
  |                                                             
  |====================================================== |  99%, ETA 00:31
  |                                                             
  |====================================================== |  99%, ETA 00:29
  |                                                             
  |====================================================== |  99%, ETA 00:28
  |                                                             
  |====================================================== |  99%, ETA 00:27
  |                                                             
  |====================================================== |  99%, ETA 00:25
  |                                                             
  |====================================================== |  99%, ETA 00:24
  |                                                             
  |====================================================== |  99%, ETA 00:23
  |                                                             
  |=======================================================|  99%, ETA 00:22
  |                                                             
  |=======================================================|  99%, ETA 00:21
  |                                                             
  |=======================================================|  99%, ETA 00:20
  |                                                             
  |=======================================================|  99%, ETA 00:19
  |                                                             
  |=======================================================|  99%, ETA 00:17
  |                                                             
  |=======================================================|  99%, ETA 00:16
  |                                                             
  |=======================================================|  99%, ETA 00:14
  |                                                             
  |=======================================================|  99%, ETA 00:13
  |                                                             
  |=======================================================| 100%, ETA 00:12
  |                                                             
  |=======================================================| 100%, ETA 00:11
  |                                                             
  |=======================================================| 100%, ETA 00:09
  |                                                             
  |=======================================================| 100%, ETA 00:08
  |                                                             
  |=======================================================| 100%, ETA 00:07
  |                                                             
  |=======================================================| 100%, ETA 00:06
  |                                                             
  |=======================================================| 100%, ETA 00:05
  |                                                             
  |=======================================================| 100%, ETA 00:03
  |                                                             
  |=======================================================| 100%, ETA 00:02
  |                                                             
  |=======================================================| 100%, ETA 00:01
  |                                                             
  |=======================================================| 100%, ETA 00:00
## returning results: ...
end <- Sys.time()
end - start
## Time difference of 41.01174 mins

Then we can calculate the specificity score for each gene as well. \(S_{g,i}=1-\sqrt{H(\frac{\sum_{1}^{n} p_g q_i}{n}) - \sum_{1}^{n} \frac{H(p_g q_i)}{n}}\)

system.time(cluster_marker_res <-
  find_cluster_markers(dat[expressed_genes,],
                       spatial_res,
                       group_by = 'Cluster',
                       morans_I_threshold = 0.25,
                       verbose=TRUE))
##    user  system elapsed 
##  11.409   1.910  13.510

Now we can take a look a the the genes that are most specific for each of the annotated clusters. This will help us with identifying cell types.

genes <-
  (cluster_marker_res %>%
  dplyr::filter(mean > 0.5, percentage > 0.1) %>%
  dplyr::group_by(Group) %>%
  dplyr::top_n(1, wt = specificity))

options(repr.plot.width=22, repr.plot.height=12)
plot_markers_by_group(dat[expressed_genes,], genes$gene_short_name, group_by = 'Cluster', ordering_type = 'maximal_on_diag')
## Warning in if (axis_order == "marker_group") {: the condition has length >
## 1 and only the first element will be used

pdf("figures/cluster_markers.pdf",width=7,height=6)
plot_markers_by_group(dat[expressed_genes,], genes$gene_short_name, group_by = 'Cluster', ordering_type = 'maximal_on_diag')
## Warning in if (axis_order == "marker_group") {: the condition has length >
## 1 and only the first element will be used
dev.off()
## quartz_off_screen 
##                 2

Here are the top 10 specific genes for each learned cluster

nGenesPerGroup<-10
top_n_genes <-
  (cluster_marker_res %>%
  dplyr::filter(mean > 0.5, percentage > 0.1) %>%
  dplyr::group_by(Group) %>%
  dplyr::top_n(nGenesPerGroup, wt = specificity))

DT::datatable(top_n_genes)

These genes suggest, for example, that group (8) may contain predominantly oligodendrocytes (Pdgfra, Olig2, Sox10, Olig1, etc).

groupOfInterest<-8
marker_genes <- top_n_genes$gene_short_name[top_n_genes$Group==groupOfInterest][1:4]
plot_cell_clusters(dat,
                   markers = as.character(marker_genes),
                   show_group_id = T, cell_size = 1)
## Warning: Using alpha for a discrete variable is not advised.

Major cell type annotation

Using insights from known and novel marker genes, we can annotate individual clusters as containing major cell types as follows:

#These will have to be manually assigned after each new clustering solution
plot_cell_clusters(dat,color="Cluster", cell_size=cell_size, show_group_id = T) + guides(color=FALSE) + coord_equal(1)

pData(dat)$CellType<-"Unknown"
pData(dat)$CellType[pData(dat)$Cluster %in% c(8,16)] <- "Oligodendrocyte"
pData(dat)$CellType[pData(dat)$Cluster %in% c(7)] <- "Astrocyte/Radial Glia"
pData(dat)$CellType[pData(dat)$Cluster %in% c(5,10,14,18)] <- "Interneurons"
pData(dat)$CellType[pData(dat)$Cluster %in% c(1,2,3,4,6)] <- "Excitatory Neurons"
pData(dat)$CellType[pData(dat)$Cluster %in% c(13)] <- "Microglia"
pData(dat)$CellType[pData(dat)$Cluster %in% c(11)] <- "Vascular Endothelium"
pData(dat)$CellType[pData(dat)$Cluster %in% c(17)] <- "Vascular Smooth Muscle"
pData(dat)$CellType[pData(dat)$Cluster %in% c()] <- "Cycling Neural Progenitor"
pData(dat)$CellType[pData(dat)$Cluster %in% c(12)] <- "Brain Fibroblasts"
pData(dat)$CellType[pData(dat)$Cluster %in% c()] <- "Doublets"
pData(dat)$CellType[pData(dat)$Cluster %in% c(15)] <- "RBCs"

colorCount <- length(unique(pData(dat)$CellType))
getPalette <- colorRampPalette(brewer.pal(9, "Set1"))

p<-plot_cell_clusters(dat,color="CellType",cell_size=0.8, show_group_id = TRUE) + scale_color_manual(values=getPalette(colorCount)) + coord_equal(1)

p

#Save to .pdf
pdf("figures/Major_celltype.pdf",width=12,height=8)
p
dev.off()
## quartz_off_screen 
##                 2

Recursive analysis and annotation of sub-celltypes

Differential Testing

Often, we design our experiments to explicitly ask refined and focused questions about differential gene expression. Monocle includes a powerful gene expression testing framework to help you find genes that are differentially expressed between groups of cells and assesses their statistical signficance. Grouping information (or other continuous parameters for your modeling) are stored in the phenoData (pData) table of each CellDataSet. Any column in pData can be added to the linear model(s). Monocle will test the signficance of each gene’s expression level across the different groups of cells defined by the comparison of two models. Monocle uses the likelihood ratio test to compare two linear models (full vs reduced) for a given gene to determine whether the parameters lost in the reduced model explain a significant amount of variance in the data.

#Takes ~6-8 minutes to run...
system.time(CellType_DE_genes<-differentialGeneTest(dat[expressed_genes],fullModelFormulaStr = "~num_genes_expressed+CellType",reducedModelFormulaStr = "~num_genes_expressed",cores=6,verbose=TRUE))
##     user   system  elapsed 
## 1695.546  419.554  415.581
sigCutoff<-1.0e-9
CellType_sigGeneIDs<-rownames(CellType_DE_genes[CellType_DE_genes$qval<=sigCutoff,])
CellType_sigGenes<-CellType_DE_genes[CellType_DE_genes$qval<=sigCutoff,"gene_short_name"]

length(CellType_sigGenes)
## [1] 6613
#pdf("figures/CellType_sigGenes_jitter_by_cluster.pdf",width=10,height=5)
#gene_logfc_easy_jitter(dat,CellType_sigGenes, celltypes = unique(pData(dat)$CellType))
#dev.off()

Below is a table of all significantly differentially expressed genes ($p $ rsigCutoff) between major CellTypes.

sigTable<-CellType_DE_genes[order(CellType_DE_genes$qval,decreasing=FALSE),]
DT::datatable(sigTable[sigTable$qval <= sigCutoff,])
## Warning in instance$preRenderHook(instance): It seems your data is too
## big for client-side DataTables. You may consider server-side processing:
## https://rstudio.github.io/DT/server.html

Pattern Discovery (NMF)

Finally, we can step beyond marker gene analysis, and use some ‘latent space’ discovery methods to learn patterns of co-regulated gene expression. These patterns can be used to identify/define: * Cell type identities * Biological processes * Spatial gradients * Other cellular features

… often with significantly greater resolution and precision than marker genes.

Importantly, these patterns are ‘data driven’ and often yield insights into the heterogeneity and complexity of a given dataset that were unanticipated.

nPatterns<-30
# Takes about ~3-4 minutes...
system.time(dat.nnmf<-nnmf(as.matrix(log10(exprs(dat)[expressed_genes,]+1)), k = nPatterns, alpha = rep(0,3), beta = rep(0,3), method = c("scd"), loss = c("mse"),
    init = NULL, mask = NULL, W.norm = -1L, check.k = TRUE, max.iter = 500L, rel.tol = 1e-4,
    n.threads = 6, trace = 10, verbose = TRUE, show.warning = TRUE))
##    user  system elapsed 
## 448.452  21.551 142.656
# Gene x Pattern matrix
dim(dat.nnmf$W)
## [1] 14241    30
# Pattern x Cell matrix
dim(dat.nnmf$H)
## [1]   30 5537
#Add patterns to phenotype data for visualization
patterns.df<-data.frame(t(dat.nnmf$H))
colnames(patterns.df)<-paste0("Pattern_",c(1:nPatterns))

pData(dat)<-cbind(pData(dat),patterns.df)

pdf("figures/patterns.pdf",width=10,height=10)
lapply(c(1:nPatterns),function(i){
plot_cell_clusters(dat, color=paste0("Pattern_",i), cell_size=cell_size) + 
    ggtitle(paste0("Pattern_",i))  + 
    scale_colour_viridis() +
    coord_equal(1)
})
## [[1]]
## 
## [[2]]
## 
## [[3]]
## 
## [[4]]
## 
## [[5]]
## 
## [[6]]
## 
## [[7]]
## 
## [[8]]
## 
## [[9]]
## 
## [[10]]
## 
## [[11]]
## 
## [[12]]
## 
## [[13]]
## 
## [[14]]
## 
## [[15]]
## 
## [[16]]
## 
## [[17]]
## 
## [[18]]
## 
## [[19]]
## 
## [[20]]
## 
## [[21]]
## 
## [[22]]
## 
## [[23]]
## 
## [[24]]
## 
## [[25]]
## 
## [[26]]
## 
## [[27]]
## 
## [[28]]
## 
## [[29]]
## 
## [[30]]
dev.off()
## quartz_off_screen 
##                 2
i<-21
plot_cell_clusters(dat, color=paste0("Pattern_",i), cell_size=cell_size) + 
    ggtitle(paste0("Pattern_",i))  + 
    scale_colour_viridis() +
    coord_equal(1)

Genes associated with learned patterns

geneWeights.df<-data.frame(dat.nnmf$W)
colnames(geneWeights.df)<-paste0("Pattern_",c(1:nPatterns))

  #fData(dat)[head(rownames(dat.nnmf$W)[order(dat.nnmf$W[,patternOfInterest],decreasing=TRUE)]),]
tmp<-merge(fData(dat)[,c("gene_id","gene_short_name")],geneWeights.df,by=0)

DT::datatable(tmp[,-1])
## Warning in instance$preRenderHook(instance): It seems your data is too
## big for client-side DataTables. You may consider server-side processing:
## https://rstudio.github.io/DT/server.html

Lets see how these patterns learned directly from the data correlate with annotated features

featuresOfInterest<-c("library_id","Genotype","Sex","num_genes_expressed","CellType")
phenoMat<-pData(dat)[,featuresOfInterest]
phenoMat$library_id<-as.numeric(phenoMat$library_id)
phenoMat$Genotype<-as.numeric(factor(phenoMat$Genotype))
phenoMat$Sex<-as.numeric(factor(phenoMat$Sex))
phenoMat$CellType<-as.numeric(factor(phenoMat$CellType))

for (a in levels(pData(dat)$library_id)){
    phenoMat[[paste("library_",a,sep="")]]<-as.numeric(factor(pData(dat)$library_id)==a)
}

for (a in levels(pData(dat)$Genotype)){
    phenoMat[[a]]<-as.numeric(pData(dat)$Genotype==a)
}

for (a in levels(pData(dat)$Sex)){
    phenoMat[[a]]<-as.numeric(pData(dat)$Sex==a)
}

for (a in levels(factor(pData(dat)$CellType))){
    phenoMat[[a]]<-as.numeric(pData(dat)$CellType==a)
}

patternPhenoCor<-cor(phenoMat,patterns.df,method="spearman")
#phenoCorTest<-cor.test(phenoMat,dat.pca$x)
patternPhenoCor.melt<-melt(patternPhenoCor)

patternPhenoCor.melt$class<-"Other"
patternPhenoCor.melt$class[patternPhenoCor.melt$Var1 %in% paste("library_",levels(factor(pData(dat)$library_id)),sep="")]<-"library"
patternPhenoCor.melt$class[patternPhenoCor.melt$Var1 %in% levels(factor(pData(dat)$CellType))]<-"Cell Type"
patternPhenoCor.melt$class[patternPhenoCor.melt$Var1 %in% levels(factor(pData(dat)$Genotype))]<-"Genotype"
patternPhenoCor.melt$class[patternPhenoCor.melt$Var1 %in% levels(factor(pData(dat)$Sex))]<-"Sex"

#col.order<-order.dendrogram(as.dendrogram(hclust(dist(t(patternPhenoCor)))))
col.order<-order.dendrogram(as.dendrogram(hclust(dist(t(patternPhenoCor[rownames(patternPhenoCor) %in% levels(factor(pData(dat)$CellType)),])))))
row.order<-order.dendrogram(as.dendrogram(hclust(dist(patternPhenoCor))))


patternPhenoCor.melt$Var2<-factor(patternPhenoCor.melt$Var2,levels=colnames(patternPhenoCor)[col.order])
patternPhenoCor.melt$Var1<-factor(patternPhenoCor.melt$Var1,levels=rownames(patternPhenoCor)[row.order])

p<-ggplot(patternPhenoCor.melt)
p<- p + geom_tile(aes(x=Var2,y=Var1,fill=value)) +
    scale_fill_gradient2(low="steelblue",mid="white",high="tomato")  +
  theme(axis.text.x=element_text(angle=-90)) +
  ggtitle("Pattern:Phenotype Correlation") + xlab("Pattern") + ylab("Feature") +
    coord_equal()
p

#pdf(paste0("projections/cut",cut,"/Projected_pattern_pheno_correlations.pdf"),width=30,height=15)
#p + theme(axis.text.x=element_text(angle=-45, hjust=0))
#dev.off()

Exploratory Analysis

Never underestimate the power of exploratory data analysis. Here’s a snapshot of the full dataset in a low-latency scRNA-Seq exploration tool being developed by the Chan Zuckerberg Initiative in conjunction with the Human Cell Atlas project.

Interactive dataset browser: http://neurocoglab.gofflab.org

Session Information

sessionInfo()
## R version 3.5.1 (2018-07-02)
## Platform: x86_64-apple-darwin15.6.0 (64-bit)
## Running under: macOS High Sierra 10.13.6
## 
## Matrix products: default
## BLAS: /Library/Frameworks/R.framework/Versions/3.5/Resources/lib/libRblas.0.dylib
## LAPACK: /Library/Frameworks/R.framework/Versions/3.5/Resources/lib/libRlapack.dylib
## 
## locale:
## [1] en_US.UTF-8/en_US.UTF-8/en_US.UTF-8/C/en_US.UTF-8/en_US.UTF-8
## 
## attached base packages:
##  [1] splines   stats4    parallel  stats     graphics  grDevices utils    
##  [8] datasets  methods   base     
## 
## other attached packages:
##  [1] bindrcpp_0.2.2        ggrastr_0.1.7         DT_0.5               
##  [4] reshape2_1.4.3        viridis_0.5.1         viridisLite_0.3.0    
##  [7] NNLM_0.4.2            dplyr_0.7.8           gridExtra_2.3        
## [10] pheatmap_1.0.12       VGAM_1.0-6            reticulate_1.10      
## [13] monocle_2.99.3        L1Graph_0.1.1         lpSolveAPI_5.5.2.0-17
## [16] DDRTree_0.1.5         irlba_2.3.3           igraph_1.2.3         
## [19] DelayedArray_0.6.6    BiocParallel_1.14.2   IRanges_2.14.12      
## [22] S4Vectors_0.18.3      matrixStats_0.54.0    stringr_1.4.0        
## [25] cellrangerRkit_2.0.0  Rmisc_1.5             plyr_1.8.4           
## [28] lattice_0.20-35       bit64_0.9-7           bit_1.1-14           
## [31] ggplot2_3.1.0         RColorBrewer_1.1-2    Biobase_2.40.0       
## [34] BiocGenerics_0.26.0   Matrix_1.2-14        
## 
## loaded via a namespace (and not attached):
##  [1] Rtsne_0.15               colorspace_1.4-0        
##  [3] deldir_0.1-16            rprojroot_1.3-2         
##  [5] listenv_0.7.0            ggrepel_0.8.0           
##  [7] codetools_0.2-15         docopt_0.6.1            
##  [9] doParallel_1.0.14        knitr_1.21              
## [11] jsonlite_1.6             Cairo_1.5-9             
## [13] cluster_2.0.7-1          shiny_1.2.0             
## [15] compiler_3.5.1           httr_1.4.0              
## [17] backports_1.1.2          assertthat_0.2.0        
## [19] lazyeval_0.2.1           limma_3.36.5            
## [21] later_0.7.5              htmltools_0.3.6         
## [23] tools_3.5.1              coda_0.19-2             
## [25] gtable_0.2.0             glue_1.3.0              
## [27] RANN_2.6.1               gmodels_2.18.1          
## [29] Rcpp_1.0.0               slam_0.1-44             
## [31] spdep_0.8-1              gdata_2.18.0            
## [33] nlme_3.1-137             DelayedMatrixStats_1.2.0
## [35] iterators_1.0.10         crosstalk_1.0.0         
## [37] xfun_0.4                 globals_0.12.4          
## [39] mime_0.6                 miniUI_0.1.1.1          
## [41] gtools_3.8.1             future_1.11.1.1         
## [43] LearnBayes_2.15.1        MASS_7.3-51             
## [45] scales_1.0.0             promises_1.0.1          
## [47] rhdf5_2.24.0             expm_0.999-3            
## [49] yaml_2.2.0               pbapply_1.4-0           
## [51] fastICA_1.2-1            stringi_1.2.4           
## [53] foreach_1.4.4            densityClust_0.3        
## [55] boot_1.3-20              manipulateWidget_0.10.0 
## [57] spData_0.3.0             rlang_0.3.1             
## [59] pkgconfig_2.0.2          rgl_0.99.16             
## [61] qlcMatrix_0.9.7          evaluate_0.12           
## [63] purrr_0.3.0              Rhdf5lib_1.2.1          
## [65] bindr_0.1.1              labeling_0.3            
## [67] htmlwidgets_1.3          tidyselect_0.2.5        
## [69] magrittr_1.5             R6_2.4.0                
## [71] pillar_1.3.1             withr_2.1.2             
## [73] sp_1.3-1                 tibble_2.0.1            
## [75] crayon_1.3.4             plotly_4.8.0            
## [77] rmarkdown_1.10           grid_3.5.1              
## [79] data.table_1.12.0        FNN_1.1.2.2             
## [81] HSMMSingleCell_0.114.0   sparsesvd_0.1-4         
## [83] digest_0.6.18            webshot_0.5.1           
## [85] pbmcapply_1.3.1          xtable_1.8-3            
## [87] tidyr_0.8.2              httpuv_1.4.5.1          
## [89] munsell_0.5.0            glmnet_2.0-16

Knit Time

With caches

knitEnd <- Sys.time()
knitEnd - knitStart
## Time difference of 14.72768 mins